无菌检测洁净室浮游菌检验及常见问题

建立无菌室浮游菌检测限度操作流程，标准无菌室浮游菌的检验。

2局限性

适用无菌室（包含清洁事儿台）浮游菌的测验和自然环境认证。

3岗位职责

QA、QC员工阅签。

4內容

4.1参照限度：GB/T16293-2010

4.2检测方法

本检测方法为记数浓度值法，即根据互联网飘浮在空气中的潜在性颗粒于专业的培养基（挑选能印证其可以适用微生物菌种生长发育的培养基），经多个時间和适宜的生长发育标准让其滋长到可以看到的菌落计数，以分辨该无菌室的细菌浓度值。

4.3测试设备、防具和培养基

浮游菌采样器、培养皿（采用与仪器设备相切合的培养皿）、培育基、控温培养箱、高压蒸汽灭菌器。

4.4测试状态及检测時间

4.4.1静态数据和信息二种情况均可举办检测，静态数据检测时，房间内检测员工不可超过2人。

4.4.2在静态数据a检测时，单边流无菌洁净车间（区），检测在空调净化系统软件正常的运转時间不少于10分鐘后最开始；非单方面流无菌室（区），检测在空调净化系统软件正常的运作不少于30分鐘后最开始。在静态数据b检测时，单边流无菌室（区），检测在生产加工实际操作员工撤出当场并经过10分鐘臭氧消毒后最开始；非单方面流无菌室（区），检测在生产加工实际操作员工撤出当场并经过20分鐘臭氧消毒后最开始。

4.5取样点真是定

4.5.1至少取样点数量见表1，每一次最少取样量见表2。

表1至少取样点数量

注：针对A级单边流无菌室（区），包含A级清洁事儿台，总面积指的是正压送风口外总面积；针对D级以上的非单方面流无菌室（区），总面积指的是屋子总面积。

表2最少取样量

4.5.2取样点部位布署宜争取均值，阻拦取样点在部分地区过度希罕，取样点依据《洁净区环境监控治理规程》配件×××生产车间洁净度检测取样点框架图的规定布署，每一个取样点一样平时取样一次。

4.5.3事儿区取样点部位距地0.8m~1.5m上下（稍高于事人情世故），正压送风口测量点部位摆脱排风面30cm上下，可在重要武器装备或重要事儿流动性局限性处增加测量点。

4.6无尘车间检测提前准备

4.6.1采样器在进到被测地区前先清洁外边，随后用75%医用酒精消毒一遍或储存于被测地区内，与被检测地区一起消毒杀菌（用以A级无菌室的采样器务必事先放到被测屋子里）。

4.6.2A/B级区接受一次性培养皿，其他地区按无菌技术规定，在质环室清洁事儿台子上提早制取培养预留（将杀菌后的培养基用沙浴消溶，制冷至约50-60℃，Φ90mm培养皿每一个竭尽约20ml培养基，Φ150mm培每一个竭尽约30ml培养基），培育皿加盖后在室内温度下发至凝结。自做好的培养皿在无菌室内储放不超越48钟头，2~8℃保存的培养皿一样平时不超越1周，一次性培养皿在标明的有效期限内应用，落伍不可应用。

4.6.3A/B级区采用的培养皿在地区消毒杀菌前一次性传到，随自然环境一起消毒杀菌，在消毒剂拿取间铁架子上储存，在有效期限内应用。如要姑且传到，则务必在前一天臭氧杀菌前根据C级与B级传达窗传到B级区举办臭氧杀菌，第二天应用。传到前外边也务必用75%酒精擦拭。其他地区用培养皿按物件传到规定当日传到应用。

4.6.4取样前，首先用75%乙醇清洗采样器的机盖、轮盘及其外罩的内外边（FKC型蜉蝣气体尘菌采样器用乙醇清洗取样头）。

4.6.5检测详尽实际操作见“JYQ-Ⅱ型浮游菌采样器限度操作流程或FKC-1型蜉蝣气体尘菌采样器限度操作流程”。

4.6.6取样竣事后，盖紧培养皿外盖，在培养皿上标明全部信息内容（包含物质生产批号，置放部位等），将培养皿用适宜的方法绑扎，倒放置30~35℃控温培养箱中培育，培养時间不少于2天。

4.6.7培养竣事后逐一查验培养皿，用眼睛对培养皿上任何的菌体立即记数、标记，随后用5~10倍高倍放大镜查验，有无忽略。若培养皿上面有2个或2个以上的菌体重合，可辨别时仍以2个或2个以上菌落计数。

4.7检测记录应包含以下几点

4.7.1被检测地区名字、检测日期、测试根据、被试者名字、测试设备及检测方法的外貌，检测时需接受的情况和房间内检测员工数，取样点数量，检测频次、取样总流量，检测实际效果（包含全部统计分析筹算材料）等。

4.7.2若为动态性检测，还应记录当场实际操作员工数量，当场武器装备运行情况等。

4.8实际效果筹算

4.8.1用记数方法得到每个培养皿的菌体数。

4.8.2每一个测量点的浮游菌均值浓度值筹算按住式举办

4.9实际效果鉴定

4.9.1每一个测量点的浮游菌均值浓度值务必小于所选中鉴定限度中的界限。

4.9.2在静态数据检测时，若某测量点的浮游菌均值菌浓度值超越鉴定限度，则应再次取样2次，两次检测实际效果均及格才气判为相符合。

4.9.3若有超越划分者，务必即时与生产制造单位联络，对该地区举办消毒杀菌或其他处理，随后再次检测至及格。

4.10一样平时监管

4.10.1浮游菌一样平时监管设纠偏装置程度和警示程度（限度局限性及抽样次数见《洁净区环境监控治理规程》），以确保无菌室（区）的细菌浓度值遭受操纵，按时检验以查验微生物菌种负载及其消毒液的法律效力，并且做好趋向分析。静态数据和信息的监管都能够接受该方法。

4.10.2针对浮游菌的抽样次数，若是涌起以下情况应考虑改动，在评定下列情况后，也应明确别的项目的检验次数

――持续超越纠偏装置程度和警示程度；

――歇工時间比预估拓宽；

――重要地区内发觉有环境污染存有；

――在生产制造时期，空气净化设备举办一切重要的检修；

――一样平时实际操作记录体现出共性的数据信息；

――消毒杀菌技术规范的更改；

――造成生物入侵的安全事故等；

――当生产制造武器装备有重要检修或增加武器装备时；

――当无菌室（区）构造或地区漫衍有重要变更时。

4.11重视事宜

4.11.1JYQ-Ⅱ型浮游菌采样器经消毒杀菌后先不放进培养皿，打开浮游菌采样器，使仪器设备中的残留消毒液挥发，時间不少于5分鐘，查验总流量并凭据取样量调节设置取样時间。

4.11.2单边流无菌室（区）或正压送风口，采样器取样口房屋朝向应正对着气旋偏重，非单方面流无菌室（区），取样口往上。

4.11.3检测时需要穿著与被测地区洁净度等级规定相切合并经高压灭菌后的洁净服。

4.11.4布署取样点时，最少应只要绕开细颗粒物较密集的回风管道。

4.11.5取样竣事，要用75%酒精喷射采样器外罩的内部和轮盘（FKC型蜉蝣气体尘菌采样器喷出取样头和爱惜盖）。

4.11.6应接受一切对策避免取样过程的环境污染和其它很有可能对样版的环境污染。

4.11.7每次培养基应该有对比实验，磨炼培养基自身是不是环境污染，可每次选中3只培养皿做为对比培养；培育皿在用以检验时，为阻拦培养皿运送或挪动过程导致的危害，宜与此同时举办对比实验，每一次或各个地区取1个对比皿，与取样皿同法实际操作但不需外露取样，随后与采集后的培养皿一起放进培养箱中培育，实际效果应无菌检测落生长发育。

4.11.8取样前要认真仔细每一个培养皿的品质，如发觉质变、损坏或环境污染的应去除。

4.11.9因为病菌品种繁多，差别甚大，记数时一样平时用电子散射光于培养皿后面或正脸细心调查，不必漏计培养皿边沿生长发育的菌体，并须重视细菌菌落或培养基沉淀的差别，必须时要高倍显微镜辨别。

4.11.10务必按时对控温培养箱举办校检。