建立洁净度（沉降菌）的磨炼限度安全操作规程，为沉降菌查验员工给予精确的限度实际操作方法。
2局限性
适用本企业洁净度（沉降菌）查验的全过程。
3义务
QA对本规程的有效实行担负监控查验义务，QC对本规程的推行用心。
4程序流程
4.1简述：本限度对
无尘车间细颗粒物及微生物菌种环境污染划分需举办自然环境操纵的屋子或地区。其建造构造、武器装备以及应用均具备减少对该地域内污染物的干预、产生和停留的作用。
4.2测试方法
4.2.1方法摘要：
本限度按我国技艺监控局公布的《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方式》，接受地基沉降法，即利用当然地基沉降基本原理互联网在空气中的微生物物体于培养基平皿，经多个時间，在适宜的前提下让其滋长到可以看到的菌体举办记数，以平板电脑培养皿中的菌体数来分辨清洁自然环境内的活微生物菌种数，并借此来鉴定洁净室（区）的洁净度。
4.2.2仪器设备
仪器设备包含：培养皿、培育基、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。
4.2.2.1培养皿
一样通常接受f90mm×15mm规格型号的培养皿。
4.2.2.2培养基
黄豆酪胚盘琼脂培养基（TSA）或沙氏培育基（SDA）或客户认同并简历证了的培养基。
4.3测试前的标准：
4.3.1测试情况；
4.3.1.1沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度记录须抵达划分的规定，负压差、换风次数、空气流速务必操纵在划分值内。洁净室（区）的溫度和空气湿度应与其说生产制造及加工工艺规定相切合（无特别要求时，溫度在18℃～26℃，空气湿度在45%～65%中间为宜），与此同时应满足测试仪器设备的应用局限性。
4.3.1.2沉降菌测试前，被测试洁净室（区）早已由消毒杀菌。
4.3.1.3测试情况有静止和信息二种，测试情况的选用务必相符合生产制造的规定，并在叙述中标明测试情况。
4.3.1.4静态数据测试时，培养皿外露時间为30min以上；动态性测试时，培养皿外露時间为不得超过4h。
4.3.2测试员工：
4.3.2.1测试员工务必衣着相符合自然环境洁净度级其他事儿服。
4.3.2.2静态数据测试时，房间内测试员工不可超过2人。
4.3.3测试時间：
4.3.3.1对单边流，如100级净化屋子及层.流事儿台，测试应在净化空调机组正
常运作不少于10min后最开始。
4.3.3.2对非单方面流，如B级、B级以上的净化屋子，测试应在净化空调机组正常的运作不少于30min后最开始。
4.3.4重视事宜：
4.3.4.1测试用品要作杀菌处理，以保证测试的稳定性、精确性。
4.3.4.2接受一切对策避免人为因素对样版的环境污染。
4.3.4.3对培养基、培育标准以及他主要参数作详尽的记录。
4.3.4.4因为病菌品种繁多，差别甚大，记数时一样平时用电子散射光于培养皿后面或正脸细心调查，不必漏计培养皿边沿生长发育的菌体，并须重视细菌菌落与培养基沉淀的差别，必须时要高倍显微镜辨别。
4.3.4.5取样前要认真仔细每一个培养皿的品质，如发觉质变、损坏或环境污染的应去除。
4.3.4.6针对单边流洁净室（区）或正压送风口，采样器取样口房屋朝向应正对着气旋偏重；针对非单方面流洁净室（区），取样口往上。
4.3.4.7布署取样点时，最少应只要绕开细颗粒物较密集的回风管道；取样时，测试员工应立在取样口的低处侧，并只要少行走。
4.3.4.8培养皿在用以检验时，为阻拦培养皿运送或挪动过程导致的危害，宜与此同时举办对比实验，每一次或各个地区取1个对比皿，与取样皿同法实际操作但不需外露取样，随后与采集后的培养皿（TSA或SDA）一起放进培养箱里培养，实际效果应无菌检测落生长发育。
4.4测试流程：
4.4.1取样方法：
4.4.1.1仪器设备和用品：培养皿。
4.4.1.2方法：
a取样点一样平时在离路面0.8m相对高度的水准表面均值布署。
b取样点超过5点时，还可以在离路面0.8m～1.5m相对高度的范围内分层次布署，但各层不少于5点。
c开启培养皿盖，使培育基外边外露0.5h，再将培养皿盖上盖子之后颠倒。
至少取样点数量
总面积
（m2）
洁净度等级
总面积
（m2）
洁净度等级
注：表格中的总面积，针对单边流洁净室，就是指正压送风口总面积。针对非单方面流洁净室就是指卧室的总面积。
至少培养皿数
洁净度等级
所需φ90mm培养皿数（地基沉降0.5h计）
4.4.2培养：
4.4.2.1仪器设备和用品：培养箱、天平秤（万分之一）、称重纸、锥形瓶（1000ml、150ml）、容量瓶（1000ml）、高压蒸汽灭菌锅。
4.4.2.2培养基：
4.4.2.2.1黄豆酪胚盘琼脂培养基（TSA）：
a）要素：酪胚盘胰酶消化吸收物15g大豆粉番木瓜胚盘酶消化吸收物5g氧化钠5g琼脂15g纯水系统1000ml
b）制作方法：取以上要素除琼脂，参杂，发烫消溶，调理pH值使杀菌后为7.3±0.2，添加琼脂，加温融化后，散装，杀菌，制冷至约60℃，在无菌技术规定下竭尽约20ml至无菌检测培养皿（f90mm）中。加盖后在室内温度放入凝结。
4.4.2.2.2沙氏培养基（SDA）：
a）葡萄糖水40g酪胚盘胰酶消化吸收物、动物组织的胃酶消化物相等参杂10g琼脂15g纯水系统1000ml
b）制作方法：取以上要素除琼脂，参杂，发烫消溶，调理pH值使杀菌后为5.6±0.2，添加琼脂，加温融化后，散装，杀菌，制冷至约60℃，在无菌技术规定下竭尽约20ml至无菌检测培养皿（f90mm）中。加盖后在室内温度放入凝结。
4.4.2.3方法：全部取样竣事后，将培养皿倒放置恒温培养箱中培育，接受黄豆酪胚盘琼脂培养基（TSA）配置的培养皿在30～35℃培育箱中培养，時间不少于2天；接受沙氏培养基（SDA）配置的培养皿在20～25℃培育箱中培养，時间不少于5天。每次培养基应该有对比实验，磨炼培养基自身是不是环境污染。可每次选中3只培养皿作对比培养。
4.4.3菌落计数：
4.4.3.1用人眼立即记数，标记或在菌落计数器上点计，随后用5～10倍高倍放大镜查验，有无忽略。
4.4.3.2若培养皿上面有2个或2个以上的菌体重合，可辨别时仍以2个或2个以上菌落计数。
4.4.4实际效果筹算：
4.4.4.1用记数方法得到每个培养皿的菌体数。
4.4.4.2均值菌体数的筹算，见式。
M1M2…Mn
均值菌体数M=
n
式中M―均值菌体数；
M1―1号培养皿菌体数；
M2―2号培养皿菌体数；
Mn―n号培养皿菌体数；
n―培养皿数量。
4.4.5实际效果鉴定：
4.4.5.1洁净室（区）内的均值菌体数务必小于所选中的鉴定限度。
4.4.5.2在静态数据测试时，若某洁净室（区）内的沉降菌均值菌体数超越鉴定限度，则务必对于此事地区先举办消毒杀菌，随后再次取样2次，测试实际效果均须及格。
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