洁净车间沉降菌监测标准规范

1目地

建立一个无尘车间洁净区（室）沉降菌检验的限度操作流程，确保洁净区微生物检验按标准实行。

2局限性

企业全部洁净车间（室）的沉降菌测量和条件的认证。

3责任者

品质技艺部对本SOP推行用心。

4程序流程

4.1本检测方法接受地基沉降法，即利用当然地基沉降基本原理互联网在空气中的微生物物体于培养基平皿，经多个時间，在适宜的前提下让其滋长到可以看到的菌体举办记数，以平板电脑培养皿中的菌体数来分辨清洁自然环境内的活微生物菌种数，并借此来鉴定洁净区（室）的洁净度等级。

4.2常用的仪器设备和武器装备

4.2.1高压蒸汽灭菌器

应用时要严苛依据“高压蒸汽灭菌器安全操作规程”和使用说明实际操作。

4.2.2恒温培养箱

务必按时对培养箱的温度表举办计量检定。

4.2.3培养皿

接受Φ90mm×15mm的硼氯化镁夹层玻璃培养皿。

4.2.4培养基

4.2.4.1简单骨头汤琼脂培养基或别的中国药典认同的培养基。

4.2.4.2培养基的打算及杀菌

4.2.4.2.1将Φ90mm的培养皿放置121℃湿热灭菌20min或180℃干热灭菌器2h。

4.2.4.2.2将培养基加温融化，冷至45℃时，在无菌技术规定下将培养基引入培养皿，每皿约15ml。

4.2.4.2.3等琼脂凝结后，将培养基平皿倒放置30℃-35℃恒温培养箱中培育

48h，若培养基平皿上确实没有菌体生长发育，就可以供取样用。制取好的培养基平皿宜在2℃-8℃的条件中储放。

4.3测试流程

4.3.1取样方法

将已制取好的培养皿按5.4.1.2的规定置放，开启培养皿盖，使培育基外边外露0.5h，再将培养皿盖上盖子之后颠倒。

4.3.2培养

4.3.2.1全部取样竣事后，将培养皿倒放置恒温培养箱中培育。

4.3.2.2在36℃±1培养箱中培育，時间不少于48h。

4.3.2.3每次培养基应该有对比实验，磨炼培养基自身是不是环境污染。可每次选中3只培养皿作对比培养。

4.3.3菌落计数

4.3.3.1用人眼立即记数，标记或在菌落计数器上点计，随后用5-10倍高倍放大镜查验，有无忽略。

4.3.3.2若培养皿上面有2个或2个以上的菌体重合，可辨别时仍以2个或2个以上菌落计数。

5重视事宜

5.1检测用品要作杀菌处理，以保证检测的稳定性、精确性。

5.2接受一切对策避免人为因素对样版的环境污染。

5.3对培养基、培育标准以及他主要参数作详尽的记录。

5.4因为病菌品种繁多，差别甚大，记数时一样平时用电子散射光于培养皿后面或正脸细心调查，不必漏计培养皿边沿生长发育的菌体，并须重视细菌菌落与培养基沉淀的差别，必须时要高倍显微镜辨别。

5.5取样前要认真仔细每一个培养皿的品质，如发觉质变、损坏或环境污染的应去除。

6检测标准

6.1测试状态

6.1.1沉降菌检测前，被测试洁净区（室）的温湿度记录须抵达划分的规定，负压差、换风次数、空气流速务必操纵在划分值内。

6.1.2沉降菌检测前，被测试洁净区（室）早已由消毒杀菌。

6.1.3测试状态有静止和信息二种，测试状态的选用务必相符合生产制造的规定，并在叙述中标明测试状态。

6.2检测员工

6.2.1检测人同务必衣着相符合自然环境洁净度等级级其他事儿服。

6.2.2静态数据检测时，房间内检测员工不可超过二人。

6.3检测時间

6.3.1对单边流，如100级净化处理屋子及层.流事儿台，检测应在空调净化系统软件正常的运作不少于10min后最开始。

6.3.2对非单方面流，如10000级、100000级以上的净化处理屋子，检测应在空调净化系统软件正常的运作不少于30min后最开始。

6.4沉降菌记数

6.4.1取样点数量以及布署

6.4.1.1至少取样点数量

地基沉降法的至少取样等级可按表1明确。

6.4.1.2取样点的布署

6.4.1.2.1事儿区取样点的部位距地0.8m~1.5m上下(稍高于事人情世故)。

6.4.1.2.2可在重要武器装备或重要事儿流动性局限性处增加取样点。

6.4.1.2.3取样点部位的具体标准见图下。

6.5记录

检测叙述中应记录屋子溫度、空气湿度、压力差及测试状态。

检测叙述的撰写见附注。

6.6实际效果

6.6.1用记数方法得到每个培养皿的菌体数。

6.6.2均值菌体数的筹算，见上式。

式中：M为均值菌体数

M1为1号培养皿菌体数

M2为2号培养皿菌体数

Mn为n号培养皿菌体数

n为培养皿数量。

6.7实际效果鉴定

用均值菌体数分辨洁净区（室）空气中的微生物菌种。100,000级洁净区沉降菌(个／m2)应低于就是l0个；10000级洁净区沉降菌(个／m2)应低于就是3个；100级洁净区沉降菌(个／m2)应低于就是1个。

6.7.1洁净区(室)内的均值菌体数务必小于所选中的鉴定限度。

 

6.7.2若某洁净区（区）内的均值菌体数超越鉴定限度，则务必对于此事地区先举办消毒杀菌，随后再次取样2次，检测实际效果均须及格。