洁净室沉降菌检测尺度操作规程

⒈ 目的：确立沉降检测的尺度操作程序，用以规范员工的检测操作。

⒉ 局限：适用于公司内部生产洁净区内的沉降菌检测事情

⒊ 责任：生产部、生产车间、质量治理部、QC磨练室主任、磨练员对本规程的执行认真。

⒋ 检测依据：YY/T0188.6－1995药品磨练操作规程，第6部门，药品生物测定法。

⒌ 内容：

5.1 装备：高压消毒锅、恒温培育箱；

5.2 培育基及平皿制备：

5.2.1 培育皿：一样平常接纳￠90mm×15mm的硼硅酸玻璃培育皿。

5.2.2 培育基一样平常接纳通俗肉汤琼脂培育基或其它药典认可的培育基。

5.2.3 将培育皿置于121℃湿热灭菌20分钟或于180℃干热灭菌2小时。

5.2.4将培育基加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培育基注入培育皿，每皿约15ml。

5.2.5 待琼脂凝固后，将培育基平面倒置于30～35℃恒温培育箱中培育48小时，若培育基平面上确无菌落生长，即可供采样用。

5.2.6 制备好的培育基平面宜在2～8℃的环境中存放。

5.3 采样点：

5.3.1 采样点的部署力争平均，阻止采样点在某局部区域过于集中，根据洁净区的面积巨细，而制订最少采样点数目，在知足最少测点数的同时，还宜知足最少培育皿数。

最少采样点数目

5.3.2 事情区采样点的位置离地0.8米～1.5米左右（略高于事人情）。并在要害装备或要害事情流动局限处增添采样点。

5.3.3 测试尺度

洁净区微生物监控的静态尺度(a)如下：

级别	沉降菌( 90mm)	频次
	cfu／0.5小时(b)
100级	≤1	1次ㄍ月
10000级	≤3	1次ㄍ月
100000级	≤10	1次ㄍ月

洁净区微生物监控的动态尺度(a)如下：

级别	沉降菌( 90mm)	频次	外面微生物		频次
	cfu／0.5小时(b)		接触碟( 55mm) cfu／碟	5指手套 cfu／手套
100级	≤1	1次ㄍ天		<1	1次ㄍ班
10000级	≤3	1次ㄍ天	――	――	――
100000级	≤10	1次ㄍ周	――	――	――

5.4 测试规则

5.4.1 测试状态

5.4.1.1 沉降菌测试前,被测试洁净室（区）的温湿度必须到达划定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在划定值内。

5.4.1.2 沉降菌测试前被测试洁净室（区）已经由消毒。

5.4.1.3 测试状态有静态和动态二种，测试状态的选择必须相符生产的要求，并在讲述中注明测试状态。

静态测试时洁净室净化空调系统已处于正常运行状态。

动态测试时洁净室已处于正常生产状态。

5.4.2 测试职员

5.4.2.1 测试职员必须穿着相符环境洁净度级其余事情服.

5.4.2.2 静态测试时，所有生产装备均已安装停当，但未运行，室内测试职员不得多于二人。

测试时间：对单向流，如100级净化房间及层流事情台，测应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后最先；对非单向流，如10000级、100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后最先。

5.4.2.3 动态测试时，所有生产装备按预定的工艺模式运行并有划定数目的操作职员在现场操作。

5.4.3 测试步骤

5.4.3.1 采样方式:将已制备好的培育皿按采样点的部署要求放置，打开培育皿盖，使培育皿外面露出0.5小时 ，再将培育皿盖盖上后倒置。

5.4.3.2 培育：所有采样竣事后，将培育皿倒置于恒温培育箱中，在30～35℃培育，时间不少于48小时。

5.4.3.3 菌落计数：用肉眼直接计数、符号或在菌落计数器上点记，然后用5～10倍放大镜检查，有无遗漏。若培育皿上有二个以上菌落重叠，可分辨时以二个以上菌落数计数。

5.5 注重事项：

5.5.1 测试用具要做无菌处置，以确保测试的可靠性，准确性。

5.5.2 接纳一切措施，防止人为对样本的污染。

5.5.3 对培育基、培育条件及其它参数做祥细的纪录。

5.5.4 计数时一样平常用透射光对培育皿后头或正面仔细考察，不要漏记培育皿边缘生长的菌落，并须注重细菌菌落与培育基沉淀物的区别。需要时，用显微镜判别。

5.5.5 采样前应仔细磨练每个培育皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。

5.6 效果盘算：

用计数方式得出各个培育皿的菌落数，按下式盘算：

          M1 M2 ……… Mn

平均菌落M=――――――――

                   n               

式中：M--平均菌落数

M1--1号培育皿菌落数

M2--2号培育皿菌落数

Mn--n号培育皿菌落数

n--培育皿总数

5.7 效果评定：用平均菌落数判断洁净室（区）空气中微生物。

5.7.1 洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定尺度。

5.7.2 若某洁净室（区）内的平均菌落数跨越评定尺度，则必须对此区域先举行消毒，然后重新采样两次，测试效果均须及格。

5.8 纪录：

5.8.1 测试讲述中应纪录房间温度、相对湿度、压差及测试状态。纪录必须有日期和实验员署名，并交质量治理科会签。

5.8.2 纪录本应保留至最后一次纪录后的二年。

5.8.3 存档处必须在纪录本中注明。