药厂净化车间沉降菌测试尺度操作规程

1、菌落：细菌培育后，由一个或几个细菌滋生而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数示意。

2、测试方式：沉降法，即通过自然沉降原理网络在空气中的生物粒子于培育基平皿，经48小时以上培育，在相宜的条件下让其滋生到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定净化车间的洁净度。

3、所用的仪器和装备

1）高压消毒锅：使用时参照文件GZ-ZL-SOP-066-00举行操作。

2）恒温培育箱：必须定期对培育箱的温度计举行检定。

3）培育皿：一样平常接纳中90mm×15mm硼硅酸玻璃培育皿。使用前将培育皿置于121℃湿热灭菌20分钟。

4、培育基：通俗营养琼脂培育基。将培育基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培育基注入培育皿，每皿约15m1。待琼脂培育基凝固后，将培育基平皿放入30～35℃恒温培育箱中培育数小时，若培育基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培育基平皿应在2～8℃的环境中存放。

5、测试步骤

1）采样方式：将已制备好的培育皿放置在预先确定的取样点，打开培育皿盖，使培育基外面露出0.5小时，再将培育皿盖上盖后倒置。
2）培育，时间不少于48小时。每批培育基应有对照试验，检查培育基自己是否污染，可每批选定3只培育皿作对照培育。

3）菌落计数：用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。若培育皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。

6、注重事项

1）测试用具要做灭菌处置，以确保测试的可靠性、准确性。

2）接纳一切措施防止人为对样本的污染。

3）对培育基、培育条件及其他参数作详细的纪录。

4）由于细菌种类繁多，差异甚大，计数时一样平常用透射光于培育皿后头或正面仔细考察，不要漏计培育皿边缘生长的菌落，并须注重细菌菌落与培育基沉淀物的区别，需要时用显微镜判别。

5）采样前应仔细检查每个培育皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。

7、测试规则

1）测试状态

（1）沉降菌测试前：被测试净化车间（区）的温湿度须到达划定的要求，静压差、必须控制在划定值内。被测试净化车间（区）已消毒。

（2）测试状态有静态和动态两种，并在讲述中注明测试状态。

（3）测试职员：测试职员必须穿着相符环境洁净度级其余事情服。静态测试时，室内测试职员不得多于2小我私人。

2）测试时间

（1）对单向流，如100级净化房间内及层流事情台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后最先。

（2）对非单向流，如10000级、100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟最先。

8、沉降菌计数
1）最少采样点数目：可按表1确定。在知足最少测点数的同时，还宜知足最少培育皿数，见表2。

表1最少采样点数目

注：表中的面积对于单向流净化车间是指送风面积，对于非单向流净化车间是指房间面积。

表2最少培育皿数

2）采样点的部署：事情区测试点位置离地0.8～1.5m左右（略高于事人情）。可在要害装备或要害事情流动局限处增添测点，采样点的部署应力争平均，阻止采样点在某 局部区域过于集中，某局部区域过于希罕。

3）纪录：测试讲述中应纪录房间温度、相对湿度、压差、测试状态及测试数据。

4）效果盘算：用计数方式得出各个培育皿的菌落数。

平均菌落数的盘算见下式：m1 m2 …… mn

平均菌落数m=n

式中：m为平均菌落数；m1为1号培育皿菌落数；m2为2号培育皿菌落数；mn为n号培育皿菌落数；n为培育皿总数。

5）效果评定：用平均菌落数判断净化车间的空气中的微生物。

6）净化车间（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定尺度（见表3）。

表3

7）若某净化车间（区）的平均菌落数跨越评定尺度，则必须对此区域先行消毒，然后重新测试两次，测试效果必须及格。

主要参考文献：国家尺度GB/T 16294-1996

原文泉源：http://www.whdcjh.com/